关键词（必填项目）： 肺泡灌洗；细胞分类计数；细胞因子
目的（必填项目）：检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下，肺部出现的各种病理改变。
　　
          例：哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高，灌洗液中各种细胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平。

主体内容（操作步骤，必填项目）：实验的准备
        实验的器材、仪器、药品：4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS；
　　手术器械：眼科剪，眼科镊，穿刺针或4号半头皮针；血细胞计数板；低温离心机
       实验操作规程：灌洗分单侧和双侧。单侧一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，0.3mlPBS反复冲洗,一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，一般3-5次即可。
　　双侧灌洗则只需要进行颈部解剖，暴露气管进行插管。PBS灌洗量增高到0.8ml.灌洗次数同上。

　　结果判定：1.回收的灌洗液4℃，1500r离心10分钟，回收上清置于-20℃等待进行细胞因子检测；
　　2.用1ml含有1%BSA的PBS重悬细胞沉淀，取10ul重悬液进行细胞计数。余液再次4℃离心，参数同上；
　　3.离心后去上清，不需太彻底，可根据第二步细胞计数所得结果和需要涂片张数决定需要残留多少上清重悬细胞沉淀。一般如果细胞总数有10*6次方/ml的话，用80-100ul重悬可以涂三张片，这样玻片上细胞密度比较适中。
　　4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于10%中性甲醛溶液中固定10分钟以上，随后就可以进行常规HE染色。
　　5。染色后就可以进行细胞分类计数，计算300个以上细胞，结果就比较可靠了。

名称：测定大鼠心肌AGEs含量标准操作规程(SOP)
关键词：大鼠心肌；AGEs含量
目的：观察糖基化终末产物的生成量，用于判定药物对糖尿病心肌病大鼠的疗效。
主体内容：
　　制备心肌匀浆组织后→离心（3000rpm，10min，4℃）→弃上清，沉淀物用去离子水洗3次，加入5ml氯仿-甲醇（2：1）→放入摇床内，4℃振荡过夜后，加入2ml甲醇，0.5ml去离子水→离心（3000rpm，10min，4℃），分别用甲醇，去离子水水化，冲洗→Hepes缓冲液冲洗2次后，将其放入5ml的Hepes缓冲液，4℃过夜→离心（3000rpm，10min，4℃），祛缓冲液→加入1ml包含Ⅴ型胶原酶（290U/ml）的Hepes液中，加入防腐剂（甲苯2µl，氯仿2µl）→放于摇床内，常温振荡消化24小时→离心获取上清液，避光静置1h→用荧光分光光度仪在370/440波长下测定荧光强度，其值用空白胶原酶校正。AGE含量以每mg羟脯氨酸（HYP）所含荧光强度为一个任意单位，用AU（arbitrary unit）表示，即AU/mgHYP。