细胞培养的一般技术
2012-05-041308
本方法是通过促细胞分裂剂与细胞表面受体相互作用，在体外触发细胞的多克隆激活。根据所使用的促细胞分裂剂的不同，应答细胞可以是T淋巴细胞、B淋巴细胞，或两者同时，或者是单核细胞。 细胞激活可以通过细胞增殖、细胞因子分泌、表面抗原表达和/或细胞体积的增加进行检测。例如在使用B细胞激活剂时，可以通过多克隆免疫球蛋白的分 泌进行检测。
表1 常用的促细胞分裂剂和多克隆淋巴细胞激活剂
促细胞分裂剂 所 用 浓 度 应 答 细 胞
刀豆蛋白AConA 1- 10 μg/ml T 淋巴细胞
植物凝集素PHA 1-5 μg/ml T 淋巴细胞
佛波醇酯PMA 1-10 ng/ml T 淋巴细胞
娄诺霉素+PMA 100-500 ng/ml T 淋巴细胞
脂多糖LPS 2-25 μg/ml 鼠B细胞（T不依赖型），单核细胞
美洲商陆PWN 试验测定 人B细胞（T依赖型）
葡萄球菌A，SAC 1/1000-1/10000 人B细胞
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