本试剂盒是用来定量分析以中国仓鼠卵巢细胞（Chinese Hamster Ovary cells，CHO-K1）为表达系统时，蛋白药物中宿主细胞残留蛋白。

CHO细胞系被广泛用来表达治疗性蛋白，在表达目的蛋白的同时，会伴随着表达细胞自身凋亡，资料显示细胞破碎后释放到培养基中的宿主蛋白达上千种之多，其中很大一部分具有很强的免疫原性，导致不良的毒性或免疫反应而危及产品安全和质量，造成潜在的生物污染，生物医药产品生产下游过程的目的之一就是移除这些潜在危害。

因此，非常有必要将宿主细胞蛋白（HCP）残留量降低到最低水平，在研发下游纯化的工艺时，必须具有一种科学合理的测定成品或者半成品中HCP浓度的方法，而酶联免疫法具有极高灵敏度，因而被FDA，EMA，NMPA及ICH等国内外监管机构定为HCP检测的金标准。

. 撕开包装袋，取出包被有抗体的酶标板，拆下不需要使用的板条，并用封板膜封好，放回铝箔袋，重新放回4℃保存（板架可重复使用）。标准品由于运输颠簸可能会粘在管壁上，使用前轻微甩匀，或在离心机上离心2秒左右。

2. 标准品的稀释：配置标准品时提前标记8只样品稀释管，预加入一定体积的稀释液，其中IS0（98μL），S1（480μL），S2至S7（各250μL）。

（1）取2μL标准品母液（浓度为500μg/mL）加入到标记为IS0的管，轻轻吹打2次并颠倒混匀（后续操作相同，切勿涡旋等剧烈混匀）。

（2）取20μL浓度为10μg/mL的IS0到S1管，轻轻吹打2次并颠倒混匀。

（3）取250μL浓度为400ng/mL的标准品S1到S2，之后以2倍梯度稀释至S7。

注：标准曲线有7个点，分别命名为S1……S7。其中S1即标准曲线的最高浓度点（400ng/mL）。（稀释过程如下图）。

3. 检测抗体（1X）：取100μL检测抗体母液（100×）加入10mL稀释液中稀释至工作浓度。

4. 加样：取50μL标准品/待测样本，100μL检测抗体（1X）加入微孔板中。空白对照（Blank Control）加入50μL样本稀释，100μL检测抗体（1X）即可。

5. 将酶标板用封板膜密封后室温振荡孵育2小时。

6. 洗板机洗板：

Ø 取出稀释好的洗液放置于洗板机的洗瓶中备用。

Ø 取出上步中的微孔，甩去微孔中的液体，洗板机洗板5次。

Ø 洗板完成后，将微孔板倒扣在吸水纸上拍打，充分拍干至无明显水膜为止。

或手动洗板：

Ø 取出稀释好的洗液放置于洗瓶中备用。

Ø 取出上步中的微孔，甩掉微孔中的液体，在吸水纸上轻轻拍打至无明显液滴。

Ø 用多道移液枪向每个微孔中加300μL洗液，静置20秒，倒去洗液，将微孔板倒扣在吸水纸上轻轻拍打。重复5次。注：第五次洗板时，充分拍干至无明显水膜为止。

7. 显色：各微孔板加入100μL TMB溶液，室温避光反应15分钟左右。若颜色浅可适当延长反应时间，勿超过30分钟。

8. 终止：各微孔中加入50μL终止液，终止反应。

9. 读取OD值：在双波长450/630nm下读取OD值。

数据分析：推荐使用四参数回归拟合。