别称
Universal Nuclease ELISA Kit
全能核酸酶酶联免疫吸附检测试剂盒
背景介绍
Universal Nuclease(全能核酸酶),是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),经基因工程改造并在大肠杆菌(E.coli)中表达纯化的非特异性广谱核酸内切酶,又称为非限制性核酸内切酶或广谱核酸酶。它能够不加选择的在链内任意核苷酸之间进行切割,将核酸降解成2~5个碱基的5’单磷酸寡核苷酸,因此全能核酸酶可高效降解各种形式(双链、单链、环状或线性)的DNA 和RNA 而不会导致蛋白的水解,被广泛用于去除生物制品中的核酸残留和污染。与此同时,生物制品中可能存在全能核酸酶的微量残留,这将对生物制品产生一定的影响。
一、试剂盒组分
| 名称 | 规格 | 数量 | 保存 | |
| 1 | 已包被平底微孔板 | 96孔 | 1板(可拆卸) | 2-8℃密封冷藏 |
| 2 | 标准品母液(1μg/mL) | 20μL | 1瓶 | -20℃冷藏 |
| 3 | HRP标记抗体浓缩液(100×) | 150μL | 1瓶 | 2-8℃冷藏 |
| 4 | TMB | 10mL | 1瓶 | 2-8℃避光冷藏 |
| 5 | 终止液 | 10mL | 1瓶 | 2-8℃冷藏 |
| 6 | 洗液(100×) | 10mL | 1瓶 | 2-8℃冷藏 |
| 7 | 稀释液(10×) | 10mL | 1瓶 | 2-8℃冷藏 |
| 8 | 封板膜 | 4张 | ||
| 9 | 使用说明书 | 1份 |
二、标准曲线实例
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Con pg/mL | OD450 | |
| S1 | 2500 | 2.191 | |
| S2 | 1250 | 1.229 | |
| S3 | 625 | 0.652 | |
| S4 | 312.5 | 0.329 | |
| S5 | 156.25 | 0.168 | |
| S6 | 78.125 | 0.087 | |
| S7 | 19.5 | 0.025 |
三、质量控制
1. 批内差:3-6% 批间差:5%
2. 灵敏度LOD:2.4pg/mL LOQ:19.5pg/mL
四参数Logistic曲线拟合
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方程: y = (A - D) / [1 + (x/C)^B] + D
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A = 8.56118
B = -1.03871
C = 7005.40240
D = 0.00637
r^2 = 1.00000
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X Y-反应值 Y-平均值 CV(%) Y-计算值 Y-残差
------------------------------------------------------------------
19.5000 0.0250 0.0253 0.0003
78.1250 0.0870 0.0858 -0.0012
156.2500 0.1680 0.1680 -0.0000
312.5000 0.3290 0.3318 0.0028
625.0000 0.6520 0.6492 -0.0028
1250.0000 1.2290 1.2301 0.0011
2500.0000 2.1910 2.1908 -0.0002
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数据个数 7
残差平方和 0.00002
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SDS


