| 人线粒体DNA拷贝数qPCR检测试剂盒 |
| Catalog #: MT-D100(100T) |
别称
人线粒体DNA拷贝数qPCR HCD；人线粒体DNA拷贝数qPCR Host Cell DNA
研究领域
定量检测培养细胞、组织、唾液、尿液、脑脊液、灌洗液、血液等不同来源的基因组DNA中线粒体DNA拷贝数
背景介绍
本试剂盒采用Taqman探针荧光定量PCR法，设计专属探针和关键引物，特异性好，灵敏度高，检测0.3ng/μL-100ng/μL范围内的DNA样本时，扩增效率可达90%-110%。
DNA参考品制备过程与其它宿主细胞DNA国家标准品制备一致，因此纯度高，无蛋白及离子干扰，保证了待测样品含量检测的准确度。
本产品中引入的dUTP/UDG防污染系统，能有效防止气溶胶污染风险。
试剂盒提供DNA稀释专用稀释液，单次实验复孔平行性及多次实验间数据重现性好。
名称：人线粒体DNA拷贝数qPCR检测试剂盒
规格：100 Tests
检测方法：Taqman探针荧光定量PCR法
储存条件：-20℃
运输条件：干冰运输
一、试剂盒组成
| DNA扩增 | ||
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 |
| MT-D100(100T) | ||
| B1 | 5X qPCR Mix | 420μL |
| B2 | Primer & Probe Mix（mtDNA+nDNA) | 340μL |
| B3 | DNA Dilution Buffer | 4×1.5mL |
| B4 | DNA Control (40ng/μL) | 25μL |
| B5 | RNase-Free H2O | 1mL |
二、结果判定
1) 无模板对照（NTC）：即反应体系中用DNA稀释液代替待检测模板，其余成分不变，线粒体DNA检测结果Ct值应为Undetermined或Ct值≥35，核DNA检测结果Ct值应为Undetermined或Ct值≥35。
2) 根据线粒体DNA引物组(mtDNA)和核DNA引物对照组(nDNA)的扩增CT值的平均值计算样品的线粒体DNA相对拷贝数。
(a) ΔCT(mtDNA) = CT(mtDNA，Sample 1) - CT(mtDNA，DNA Control)
(b) ΔCT(nDNA) = CT(nDNA，Sample 1) - CT(nDNA，DNA Control)
(c) ΔΔCT = ΔCT(mtDNA) - ΔCT(nDNA)
(d)样品1的线粒体DNA拷贝数 = 标准品的线粒体拷贝数×2 -ΔΔCT
3)计算示例：
| 样本名称 | Ct值（mtDNA) | Ct值（nDNA) |
| Sample 1（重复1） | 15.023 | 24.035 |
| Sample 1（重复2） | 15.157 | 24.158 |
| Sample 1（重复3） | 15.089 | 24.098 |
| DNA Control（重复1） | 16.498 | 27.277 |
| DNA Control（重复2） | 16.741 | 27.092 |
| DNA Control（重复3） | 17.004 | 27.112 |
| Sample 1 平均值 | 15.09 | 24.097 |
| DNA Control 平均值 | 16.748 | 27.16 |
ΔΔCT =【CT(mtDNA，Sample 1) - CT(mtDNA，DNA Control)】 - 【CT(nDNA，Sample 1) - CT(nDNA，DNA Control)】
=（15.09-16.748）-（24.097-27.16）
=1.405
Sample 1 的线粒体拷贝数
=DNA Control的线粒体DNA拷贝数×2 -ΔΔCT
=879×2-1.405
=332拷贝/细胞
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