背景

     纵观生物制药发展史，伴随药物质控安全，到目前为止，Cygnus公司HCP产品已有40年历史。毫无疑问Cygnus公司产品是全球HCP厂家最优秀的存在。赛唐生物(Cellgene)以Cygnus公司为学习标杆。所以，系统进行了典型药物样本的产品检测性能比较。

     经过对HCP产品十五年的积淀和开发，赛唐生物(Cellgene)已经在多类型样本的检测体系上有了质的飞跃。我们通过联合上百家生物药企，筛选典型的药物样本（CHO和E.coli表达系统），进行系统的性能比较。

     鉴于E.coli和CHO HCP为全球药物审批表达系统的主流，所以，以E.coli和CHO HCP为例，货号和HCP kit类型，见下表，将赛唐生物(Cellgene)与美国Cygnus产品作比较。

结果

一、药物类型与货号：

表1

表2

Note：Protein A：单抗药物的Protein A纯化

    HCCF：抗体药物的细胞培养收获上清

    AC2-E：抗体药物的Protein A与离子交换层析洗脱样本

    Drug：抗体药物纯化终产物样本

图1

     我们选择药物的不同纯化阶段的代表性样本，在ELISA体系下，梯度稀释比较OD变化（也代表浓度梯度）。DS1是客户药物的Protein A层析产物，灰色是Cygnus，浅蓝色是我们以前的检测结果，深蓝色是最新的检测结果。见图1-A。DS2是客户药物的HCCF产物，与F550-1检测结果持平。见图1-B。

     我们可以注意到，针对同一样本，从开始的样本数据，Cellgene较Cygnus存在不小的差距，见图1-A，1-B，浅蓝色与灰色曲线对比。到现在接近的样本OD，见图1-A，1-B，深蓝色与灰色曲线比较。甚至在部分样本中，表现出了可以媲美Cygnus的数据，见图1-C。同时，在含有痕量HCP的样本中，赛唐生物凭借极低的本底水平，在低浓度样本中，持续稀释后，OD介于0.033-0.004，仍然能后表现出显著的梯度下降的OD，针对超痕量HCP的含量参考对比，显著扩大了定量范围。见图1-D。

二、本底水平：

图2

     蓝色框为Cygnus F550-1多个独立时间和人员的检测本底水平，多数集中在OD 0.05-0.09以内。其余ELISA本底数据均为Cellgene原始数据整理。可以看出Cellgene HCP ELISA本底从0.1水平（2022年），到0.05水平（2024年），再降到0.01水平（2025年）。通常，内控可达0.004-0.009。充分代表了赛唐生物ELISA的技术体系不断进化，且将在药物质量安全细分领域持续深耕发力。见图2。

Note：关于本底控制内容，详见《本底“瘦身”计划：HCP ELISA开发记》。

三、体系回收率：

图3

     随着技术的不断进步，药物类型（重组蛋白，单抗，双特异性抗体，X抗体等），靶点类型，药物缓冲体系，药物纯化介质更新，杂质变化维度更多，所以对HCP的ELISA检测的干扰稳定性考验愈发严苛。

     Cellgene从样本中筛选的极端的缓冲体系药物进行了梯度稀释，使用Cellgene开发的HCP ELISA buffer(CH-DIL1)，进行ELISA的回收率比较。可以看到回收率可以控制在100±20%以内（实际质控范围为100±30%）。所以，本体系将会适应更多的药物类型和药物保存缓冲体系。为药物工艺开发的HCP定量，提供更为可靠的数据信息。见图3。

四、High Risk Protein:

     经过HCP抗体的质谱对比分析，常见的高风险因子蛋白，Cellgene相比Cygnus都有显著的HCPs富集和覆盖。如脂蛋白酶、核糖体蛋白，S100蛋白、和转录生长因子等HCPs，都是药物及其免疫原性的主要HCPs。见图4。

Note：关于质谱覆盖度的技术介绍，参考赛唐生物HCPs白皮书《Affinity Purification of Antibodies Using AAE for HCP Removal, Characterization, and Batch-to-Batch Quantification Stability》介绍。

图4

讨论

     我们通过优化后的HCP ELISA试剂盒，与Cygnus厂家，在ELISA本底、体系回收率、抗体的HCPs富集质谱、以及临床期药物随机筛选的典型纯化产物稀释检测，做了系统的对比。可以看到独立样本稀释线性和浓度，ELISA体系本底和回收率三个方面进行比较。总体表现为Cellgene本底较Cygnus更低，可以排除更多非特异性结合。样本检测区间广泛。样本检测浓度更贴合。回收率性能优异。并且关于HCP ELISA开发质控，赛唐生物已经详细阐述，详见《全面解析中华仓鼠卵巢细胞（CHO）宿主蛋白（HCP）,G3残留检测试剂盒》。

Note：赛唐生物研发数据为电子系统，上述数据支持数据审查。

     在各个方面都能达到Cygnus的水平，尤其是在本底和极端缓冲液样本的回收率控制方面尤为突出。并且我们支持协助客户样本做验证和特征性优化，以及委派技术服务人员做试剂盒上门使用培训。

前瞻

虽然传统生物制药的生产工艺，已经逐渐锁定。但是，其风险安全首要因素主要源于全球供应链，详见《拒绝低效内卷：中国药企如何破局全球质量话语权之争？》。但是新兴的生物药物，正在逐渐展示强大的治疗潜力，和充满韧性的授权出海前景。通常，新药的开发速度，取决于产业链的上下游合作。而产业链合作效益，远远大于低效重复的收益。

赛唐生物坚持：不做百货铺，只做专卖店；不做大而广，只做小而精；缩小经营范围，聚焦质控板块，锚定中国生物药上下游供应链。赛唐生物专注ELISA二十年，将继续坚守深耕HCP质控细分领域。

更多HCP Kit持续上线……

参考标准

[1] ICH Q6B：Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotech

nological/Biological Products.

[2] ICH Q7：Good Manufacturing Practice Guide for Active Pharmaceutical Ingredients.

VX：13764544806

WEB：www.bluegene.cc 

www.cellgenebio.com

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