【摘要】目的: 探讨单独和联合应用维甲酸( retinoic acid，RA) 与purmorphamine ( 2，6，9-三取代嘌呤化合物，PM) 对人脐带间充质干细胞( human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs) 向运动神经元分化的影响，为其进一步临床应用提供实验依据。方法: 用双酶消化法提取纯化hUCMSCs，取传至第3 代的hUCMSCs，流式细胞仪检测表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44 的表达情况。根据加入不同诱导剂分4 组: 空白对照组; RA 组( 加入0． 5 μg /ml RA) ; PM 组( 加入1 μg /ml PM) ; RA + PM 组( 加入0． 5 μg /ml RA 和1 μg /ml PM) 。细胞诱导后第20d，观察细胞形态的变化; 采用免疫细胞化学方法检测Nestin、β-tubulin-III、Hb9、ChAT 的表达情况，比较各组细胞阳性表达的比例。RA + PM 组细胞诱导5、10、15、20、25 d 后收集细胞，检测细胞内Ach 的含量。结果: 流式细胞仪检测结果显示，CD29、CD44 高表达，CD31 阴性，CD34 不表达。空白对照组和PM 组细胞诱导后形态变化不明显，Nestin 和β-tubulin-III 阳性表达率均很低，两者之间无差别。RA 组和RA + PM 组的诱导后细胞具有典型的神经元样形态; 且Nestin 和β-tubulin-III 阳性表达率比其他两组高，有显著性差异( P ＜ 0． 01) 。4 组中只有RA + PM组细胞诱导后出现Hb9 表达阳性，其他各组均无Hb9 表达。RA + PM 组ChAT 高表达，RA 组仅少量表达。从第15 d 起，RA + PM 组细胞可检测到Ach，其含量随着诱导时间的延长逐渐增加。结论: RA 能促进hUCMSCs 向神经元分化，单独使用PM 并没有明显效果，而RA 联合PM 能显著促进hUCMSCs 向运动神经元分化。

【关键词】人脐带间充质干细胞; 运动神经元; 维甲酸; purmorphamine; 诱导