镉诱导鲫肝细胞内 Ca2 +-ATP 酶与金属硫蛋白的表达
2011-08-301306
摘要: 研究了镉诱发鲫肝细胞相关的胞内游离钙离子变化,以及Ca2 + -ATP 酶及金属硫蛋白表达量的变化。试验分为对照组、5、10、15、20 μmol /L CdCl25 个组。Ca2 + 用Fura-2 /AM 方法检测,试验后24 h 用荧光倒置显微镜观察细胞内游离钙离子变化; 分光光度法检测Ca2 + -ATP 酶; 石墨炉—原子分光光度法检测了细胞内镉离子浓度; 免疫酶联法( ELISA) 检测了金属硫蛋白( MT) 含量。结果显示,镉可导致细胞存活率下降,具有一定的毒性。镉离子引起胞内Ca2 + 荧光强度和Ca2 + -ATP 酶活性增加( P < 0. 01) 。随镉浓度升高,处理组Ca2 + -ATP 酶浓度活性分别是对照组的4. 52、6. 73、6. 68、7. 19、6. 18 倍; 暴露24 h 后各组细胞内镉离子均有上升,其中5 μmol /L 组最高,达( 2. 045 ±0. 322) μmol /L; 各处理组金属硫蛋白( MT) 含量增高( P < 0. 01) ,且5 μmol /L 低浓度组MT 增幅最大,达17. 15%。结果提示,镉诱导下细胞内Ca2 + 升高,MT 表达量上升,且MT可螯合进入细胞内的镉离子,这种螯合可能是降低镉毒理作用的机制之一。
关键词: 肝细胞; 镉; Ca2 + -ATP 酶; 金属硫蛋白